بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم a در باکتری اشریشیاکلی به عنوان کاندیدای تولید واکسن بوتولیسم
نویسندگان
چکیده
چکیده زمینه و هدف: بوتولیسم بیماری کشنده ای است که توسط نوروتوکسین یکی از هفت نوع کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می شود. بخش کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ a(bont/a-hc)، از قابلیت بالایی در تحریک سیستم ایمنی برخوردار است که امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می رود. هدف از این پژوهش بیان و تخلیص فرم محلول این بخش از نوروتوکسین در باکتری اشریشیاکلی نوترکیب می باشد. روش بررسی: در این تحقیق وکتور pet28aحاوی ژن bont/a-hc به باکتری اشریشیاکلی نوترکیب انتقال داده شد. در ادامه، بهترین کلنی از سویه نوترکیب بر اساس سه شاخصه مهم میزان رشد باکتری، بیان پروتئین و پایداری پلاسمید انتخاب شد. سپس بیان محصول در محیط کشت lb و m9 اصلاح شده بررسی، و پروتئین مورد نظر با ستون کروماتوگرافی رزینی تخلیص گردید. یافته ها: در شرایط بهینه شده کشت باکتری در مقیاس فلاسک، 52 میلی گرم پروتئین محلول bont/a-hcبه ازای یک لیتر محیط کشت حاصل شد. نتیجه گیری: براساس یافته های این تحقیق می توان نتیجه گیری کرد که انتخاب سویه مناسب براساس شاخصه های مهم رشد باکتری، بیان پروتئین نوترکیب و پایداری پلاسمید در افزایش بازدهی تولید پروتئین نوترکیب مؤثر است. کلید واژه ها: بیان پروتئین، اشریشیاکلی، کلستریدیوم بوتولینوم، بوتولیسم وصول مقاله: 26/11/89 اصلاحیه نهایی: 21/2/90 پذیرش مقاله: 28/2/90
منابع مشابه
بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در باکتری اشریشیاکلی به عنوان کاندیدای تولید واکسن بوتولیسم
چکیده زمینه و هدف: بوتولیسم بیماری کشنده‌ای است که توسط نوروتوکسین یکی از هفت نوع کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می‌شود. بخش کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ A(BoNT/A-Hc)، از قابلیت بالایی در تحریک سیستم ایمنی برخوردار است که امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می‌رود. هدف از این پژوهش بیان و تخلیص فرم محلول این بخش از نوروتوکسین در باکتری اشریشیاکلی نوترک...
متن کاملمقایسه کمی تولید پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم A در کشت‌های ناپیوسته و ناپیوسته خوراک‌دهی‌شده باکتری اشرشیا کلی
Background and purpose: The 50 KDa protein (50 µg) in carboxylic domain of the neurotoxin heavy chain (BoNT/A-Hc) recognizes surface receptors on target neurons and this fragment contains the principle protective antigenic determinants. Recently, this fragment has been used as a recombinant vaccine candidate for botulism. The study aimed to compare the evaluation of BoNT/A-Hc production in fed-...
متن کاملمطالعه توده ای شدن حرارتی کاندیدای واکسن بوتولینوم در انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم تیپ E
زمینه و هدف: مطالعه توده ای شدن حرارتی پروتئین یک روش ساده و مفید برای مطالعه مقاومت پروتئین به واسرشتگی حرارتی است و اطلاعات ارزشمندی در مورد ساختار پروتئین ارائه می دهد. از آنجایی که تا به حال هیچگونه اطلاعاتی در مورد ساختار زیر واحد اتصال دهنده ی نوروتوکسین بوتولینوم تیپ E (rBoNT/E-HCC) گزارش نشده است، لذا این مطالعه با هدف بررسی ساختاری پروتئین مذکور، یافتن شرایط pH بهینه برای آن و توده ا...
متن کاملمطالعه توده ای شدن حرارتی کاندیدای واکسن بوتولینوم در انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم تیپ e
زمینه و هدف: مطالعه توده ای شدن حرارتی پروتئین یک روش ساده و مفید برای مطالعه مقاومت پروتئین به واسرشتگی حرارتی است و اطلاعات ارزشمندی در مورد ساختار پروتئین ارائه می دهد. از آنجایی که تا به حال هیچگونه اطلاعاتی در مورد ساختار زیر واحد اتصال دهنده ی نوروتوکسین بوتولینوم تیپ e (rbont/e-hcc) گزارش نشده است، لذا این مطالعه با هدف بررسی ساختاری پروتئین مذکور، یافتن شرایط ph بهینه برای آن و توده ای ...
متن کاملمقایسه کمی تولید پروتئین نوترکیب انتهای کربوکسیل نوروتوکسین بوتولینوم a در کشت های ناپیوسته و ناپیوسته خوراک دهی شده باکتری اشرشیا کلی
سابقه و هدف: پروتئین 50 کیلو دالتونی واقع در انتهای کربوکسیل زنجیره سنگین نوروتوکسین کلستریدیوم بوتولینوم تیپ a (bont/a-hc) امروزه برای تولید واکسن نوترکیب علیه بوتولیسم به کار می رود. هدف از این پژوهش بررسی تولید این پروتئین نوترکیب در باکتری اشرشیا کلی در کشت های با تراکم سلولی بالا (ناپیوسته خوراک دهی شده) و مقایسه تولید آن با کشت های ناپیوسته بود. مواد و روش ها: در این مطالعه، رشد باکتری اش...
متن کاملهمسانسازی و بیان نوترکیب دُمین انتهای کربوکسیل پروتئین اینتیمین پاتوژن EHEC در باکتری اشرشیا کلی سویه BL21(DE3)
چکیده زمینه و هدف: بخشی از عفونت‌های روده‌ای به‌واسطه پاتوژن‌هایی به‌وجود می‌آ‌یند که با مصرف مواد غذایی آلوده وارد سیستم گوارش انسان می‌شوند. در لانه‌گزینی باکتری E. coli O157:H7 در روده بزرگ مجموعه‌ای از پروتئین‌ها که برخی از آنها شروع‌کننده این فرآیند بوده و فقدان آنها مانع از این پدیده می‌شود، دخیل هستند. هدف از انجام این پژوهش همسان‌سازی و بیان نوترکیب پلی‌پپتید ا...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
مجله دانشگاه علوم پزشکی کردستانجلد ۱۶، شماره ۲، صفحات ۳۶-۴۴
کلمات کلیدی
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023